期刊简介
本刊创刊于1983年，由上海市儿科医学研究所及上海交通大学医学院附属新华医院主办。本刊遵循面向临床、面向全国、面向基层、面向普及的办刊宗旨，反映本学科学术水平和发展动向。主要读者为全国二、三级医院的医师。除每期设有一个系统疾病专栏（包括呼吸、消化、神经、血液、心血管、肾脏、免疫、遗传、代谢、内分泌等系统），此外还设综合报道、儿保、实验研究、临床病理（例）讨论、疑难病例分析、综述、讲座、临床经验点滴、误诊教训、临床用药、诊治技术等十余个栏目。
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首页>临床儿科杂志
- 杂志名称：临床儿科杂志
- 主管单位：上海市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：上海市儿科医学研究所 上海交通大学医学院附属新华医院
- 国际刊号：1000-3606
- 国内刊号：31-1377/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
卡介苗HSP70基因转染HL-60细胞瘤苗制备及抗瘤机制的研究
李晓玲；刘春雷；孙立荣
关键词：卡介苗, 热休克蛋白70, 基因转染, HL-60, 肿瘤疫苗
摘要：目的：构建卡介苗（BCG）热休克蛋白70（HSP70）的真核表达载体，通过基因转染表达HL-60细胞表面，研究其抗瘤作用和机制。方法利用多聚酶链反应（PCR）方法扩增HSP70基因，与真核表达载体pDisplay连接，构建重组载体pDisplay-HSP70，并利用脂质体2000将其转染HL-60细胞。HL-60细胞分为未转染的HL60-wt组、转染空载体pDisplay的HL60-pDisplay组、转染重组载体pDisplay-HSP70的HL60-HSP70组，分别与外周血T淋巴细胞培养72 h，羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记和流式细胞术测定淋巴细胞增殖指数，ELISA法检测IFN-γ水平；各组HL-60细胞与T淋巴细胞混合培养6 d后获细胞毒性T淋巴细胞（CTL）效应细胞，加入HL-60靶细胞以不同效靶比共培育12 h，LDH释放改良法检测CTL细胞杀伤活性。结果扩增获得的HSP70基因大小与理论值一致，重组载体pDisplay-HSP70构建正确。HSP70表达在转染后的HL-60细胞表面。转染后的HL-60细胞，即HL60-HSP70组能明显促进异体T细胞扩增，该组CFSE阳性率、IFN-γ含量、CTL杀伤率均高于HL60-wt和HL60-pDisplay组，差异均有统计学意义（P<0.05）；后两组间差异则无统计学意义（P>0.05）；随效靶比增大，HL60-HSP70组CTL细胞杀伤活性逐渐增强，差异有统计学意义（P<0.05）。结论成功构建真核表达载体pDisplay-HSP70，并制备膜表面表达BCG HSP70的HL-60细胞瘤苗，HSP70基因转染后能明显增强HL-60细胞的免疫原性。
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