期刊简介

               本刊创刊于1983年,由上海市儿科医学研究所及上海交通大学医学院附属新华医院主办。本刊遵循面向临床、面向全国、面向基层、面向普及的办刊宗旨,反映本学科学术水平和发展动向。主要读者为全国二、三级医院的医师。除每期设有一个系统疾病专栏(包括呼吸、消化、神经、血液、心血管、肾脏、免疫、遗传、代谢、内分泌等系统),此外还设综合报道、儿保、实验研究、临床病理(例)讨论、疑难病例分析、综述、讲座、临床经验点滴、误诊教训、临床用药、诊治技术等十余个栏目。                

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  • 杂志名称:临床儿科杂志
  • 主管单位:上海市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:上海市儿科医学研究所 上海交通大学医学院附属新华医院
  • 国际刊号:1000-3606
  • 国内刊号:31-1377/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
临床儿科杂志2005年第07期

制备hHO-1突变体以降低胆红素水平实验研究

夏振炜;钟文伟;李云珠;俞善昌;崔文俊;周文普;张雪洪

关键词:血红素加氧酶-1, 定点突变, 活性, 胆红素
摘要:目的制备人血红素加氧酶-1(human heme oxygenase-1, hHO-1)突变体,探讨酶的作用机制并应用突变体降低胆红素水平,为防治新生儿期高未结合胆红素血症的发生提供新途径.方法采用 PCR方法制备 hHO-1 His25Ala 突变体(△hHO-1) cDNA,构建突变体表达载体 pBHO-1(M).野生型和突变体表达载体 pBHO-1和 pBHO-1(M)分别转化大肠杆菌 DH5α, IPTG诱导表达目的蛋白.经 30%~ 60%(NH4) 2SO4盐析、Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂分离纯化,并进行酶活性测定.结果构建的载体能分别表达产物,经 30%~ 60%(NH4) 2SO4盐析后纯度提高 3.6倍,再经 2次 Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂分离纯度提高 30倍,酶活性测定显示,△hHO-1较野生型 hHO-1(whHO-1)活性下降了 91.21%.结论hHO-1的第 25位组氨酸在酶与底物血红素氧化反应中起着重要作用,制备的△hHO-1能明显降低胆红素水平.